ПЕРВЫЙ ЭТАП: ИОНИЗАЦИЯ (MALDI)
Для проведения масс-спектрального анализа необходимо, прежде всего, перевести нейтральные молекулы и атомы, составляющие любое органическое или неорганическое вещество, в заряженные частицы - ионы.
Наиболее подходящим методом ионизации органических соединений является MALDI (matrix-assisted laser desorption/ionization), ионизация лазерной десорбцией при содействии матрицы.
В методе MALDI коротким мощным импульсом лазерный луч вырывает ионы с поверхности мишени, на которую нанесен образец со специально подобранной матрицей. Молекулы подложки-матрицы испаряются, ионизируются и увлекают исследуемые биоорганические молекулы, передавая им электрический заряд для дальнейшего их разгона в электрическом поле.
ВТОРОЙ ЭТАП: СОРТИРОВКА ИОНОВ (TOF-MS)
Принцип TOF-MS (Time Of Flight Mass-Spectrometry) основан на фиксации разницы времени достижения сенсора ионов с разной массой. Ионы разгоняются в электрическом поле и направляются через вакуумную камеру к детектору.
Согласно физическим законам траектория заряженных частиц в магнитном поле искривляется, а радиус кривизны зависит от массы частиц. Именно эта закономерность используется для анализа ионов по массам.
Время движения регистрируется. Время обратно пропорционально скорости молекулы, которая, в свою очередь, прямо пропорциональна отношению массы летящей молекулы к ее заряду (m/z).
Эти параметры (масса, время движения, скорость) - уникальны для каждой молекулы и определяются исключительно ее нуклеотидной последовательностью, поэтому чувствительность метода чрезвычайно высока.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ MALDI В КОМПЛЕКСЕ С ВРЕМЯПРОЛЕТНОЙ МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЕЙ TOF-MS ОБЕСПЕЧИЛО НАСТОЯЩИЙ ПРОРЫВ В АНАЛИЗЕ СЛОЖНЫХ БИООРГАНИЧЕСКИХ МОЛЕКУЛ, НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ И БЕЛКОВ.